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人百日咳毒素(PT)ELISA试剂盒

人百日咳毒素(PT)ELISA试剂盒
Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-02-21
  • 访 问 量:244
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产品详情
品牌 其他品牌 货号 RQ-FW0512A
规格 96T/48T 供货周期 现货
主要用途 科研试验 品牌 瑞清
方法 酶联免疫法 检测种属 人,小鼠,大鼠,植物,鱼,虾,蟹,牛,羊,狗,猫,微生物,细胞,土壤等动植物
售后 专属服务 可售地 全国

人百日咳毒素(PT)ELISA试剂盒

ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定ti,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,

免责声明

1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

3. 产品特点

一、高效、灵敏、特异的抗ti;

二、稳定的重复性和可靠性;

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;

五、节省实验经费。

雷竞技Q 回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为29.8mg/L,则认为回收率为99%

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人百日咳毒素(PT)ELISA试剂盒

实验过程:

1.试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请 使用一次性的吸头,避免交叉污染。

2.加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,第yi个孔与最hou-一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育“时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品) 将控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。

3.孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态:同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

4.洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响最hou的酶标仪读数。


常见问题解析:

1、试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。

2、加样中可能遇到的问题。

3、洗板时容易造成误差。

4、显色问题:使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长,都有可能造成显色剂不显色。

5、终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,产生气泡,造成假阳性结果,所以在倒终止剂的时候要缓慢倒。

6、读板:读板的时候首先应该保证板的清洁干净。


常用方法及原理如下:

1.夹心法:

夹心法常用于检测大分子抗原,一般的操作步骤为:

a.将具有专一性的ti固著(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余ti

b.加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的ti进行专一性键结

c.洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次ti,与待测抗原进行键结

d.洗去多余未键结一次ti,加入带有酶的二次ti,与一次ti键结

e.洗去多余未键结二次ti,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果

原理:针对抗原分子上2个不同抗原决定簇的单克隆ti分别作为固相ti和酶标ti,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物。

2.间接法

间接法常用于检测ti,一般的操作步骤为:

a.将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。

b.加入待测检体,检体中若含有待测的一次ti,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。

c.洗去多余待测检体,加入带有酶的二次ti,与待测的一次ti键结。

d.洗去多余未键结二次ti,加入酶底物使酶呈色,藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值),以评估有色终产物的含量即可测量待测ti的含量。

原理:利用酶标记的抗ti以检测已与固相结合的受检ti

3.竞争法

竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制,一般用于检测小分子抗原,其操作步骤为:

a.将具有专一性的ti固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余ti

b.加入待测检体,使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的ti进行专一性键结

c.加入带有酶的抗原,此抗原也可与塑胶孔盘上的ti进行专一性键结,由于塑胶孔盘上固著的ti数量有限,因此当检体中抗原的量越多,则带有酶的抗原可键结的固著ti就越少,亦即,两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上ti键结,即所谓竞争法之由来。

d.洗去检体与带有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,当检体中抗原量越多,代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少,显色也就越浅。

e.当需要侦测无法获得两种以上单一性ti的抗原,或是不易得到足够的纯化ti以固著于孔盘上时,一般会考虑使用竞争法ELISA

试剂和样本的控制方法:

一、试剂

1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行生产,已获得国家承认的“三证",每一个产品都有对应的生产批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。

2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。

二、样本

1.内源性干扰因素:包括类因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;

类因子的控制方法:

①用F(ab)2替代完整的IgG;

②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;

③检测抗原时,可用2-ji乙醇加入到标本稀释液中使RF降解;

补体的控制方法:

①用EDTA稀释标本;

5630 min加热血清使C1q灭活;

2.外源性干扰因素:包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等;

控制方法:采血时规范操作,采集的血液勿用力震荡,以防溶血;收集标本时采用无菌试管,经检测后再低温冻存;保存时间不宜过久,检测时尽量采用新鲜标本;对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再离心分离血清。

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