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猪刺鼠基因相关蛋白(AGRP)简介

更新时间:2022-11-26 浏览次数:378

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本猪刺鼠基因相关蛋白(AGRP水平。用纯化的猪刺鼠基因相关蛋白(AGRP抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入刺鼠基因相关蛋白(AGRP),再与HRP标记的刺鼠基因相关蛋白(AGRP抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的刺鼠基因相关蛋白(AGRP呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品猪刺鼠基因相关蛋白(AGRP浓度。

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标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最hao控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最hao做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第yi孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

保存条件及有效期

1试剂盒保存:2-8

2.有效期:6个月

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